目錄

前言 I

第 1 章 飼料中斑蝥黃含量的測定 1

1.1 儀器設備與試劑 1

1.2 實驗方法 2

1.2.1 標準混合工作液配製 2

1.2.2 色譜條件 2

1.3 實驗結果 3

1.3.1 典型分離色譜圖 3

1.3.2 線性與檢出限 3

第 2 章 動物源性食品中斑蝥黃的測定 4

2.1 儀器設備與試劑 4

2.2 實驗方法 6

2.2.1 標準混合工作液配製 6

2.2.2 試劑配製 6

2.2.3 樣品前處理 6

2.2.4 色譜條件 6

2.3 實驗結果 7

2.3.1 典型分離色譜圖 7

2.3.2 線性與檢出限 8

2.3.3 實際樣品分離色譜圖 8

前言

2019 年 3・15 晚會曝光了多個雞蛋品牌使用斑蝥黃飼養出的籠養雞蛋冒充 “土雞蛋” 高價銷售，欺騙消費者，著實又引起一大片偏愛土雞蛋消費者的驚恐之聲。那麽，這雞蛋的化妝品 -- 斑蝥黃，到底是什麽呢？

斑蝥黃是一種維生素 A 源類胡蘿卜素，亦稱角黃素。它天然存在於許多食物中，如蘑菇、魚類和蛋類等。作為色素，可以從天然產品中提取，也可以通過人工進行合成。其作為飼料添加劑混合在動物飼料中使用，可以使食用的禽類、三文魚等肉質顏色更加紅潤，蛋黃的顏色更加鮮明誘人。

從目前的研究來看，該色素安全性佳，合理使用，不會對人體健康產生不利影響。我國原農業部發布的《飼料添加劑品種目錄 (2013)》中規定，斑蝥黃是可以作為著色劑在家禽飼料中添加使用的。在歐盟國家，斑蝥黃也是允許被作為著色劑，添加到鱒魚飼料、鮭魚飼料和家禽飼料中，且有明確的限量標準：蛋雞飼料中 8 毫克 / 千克，其他家禽和鮭科動物飼料中 25 毫克 / 千克。

目前我國對斑蝥黃的使用、“土雞蛋” 的規範等還未有明確標準，雖然 “化妝雞蛋” 不會對百姓身體健康造成影響，但利用 “化妝雞蛋” 欺騙消費者，卻是違法行為。

丝瓜视频黄色视频公司依據《NYT2896-2016 飼料中斑蝥黃的測定 高效液相色譜法》和《SN/T 2327-2009 進出口動物源性食品中角黃素、蝦青素的檢測方法》分別對飼料中和雞蛋中的斑蝥黃進行了檢測，推出了斑蝥黃檢測解決方案，與 3・15 一起，守護大家食品安全，保障消費者權益。

I

第 1 章 飼料中斑蝥黃含量的測定

此方法參考《NY/T 2896-2016 飼料中斑蝥黃的測定 高效液相色譜法》，本標準適用於預混合飼料添加劑、濃縮飼料及配合飼料中斑蝥黃的測定。

1.1 儀器設備與試劑

表 1-1 (a) EClassical 3100 型高效液相色譜係統設備標準配置清單

1.2 實驗方法

1.2.1 標準混合工作液配製

標準品的工作液：取一定體積標準儲備液，用流動相稀釋並定容至所需濃度。

1.2.2 色譜條件

流動相：正己烷 / 丙酮 = 93/7 (V/V)

色譜柱：Supersil SiO2 4.6×250mm

流速：1.5mL/min

波長：466nm

進樣量：20µL

溫度：30℃

1.3 實驗結果

1.3.1 典型分離色譜圖

進樣分析濃度為 5.0µg/mL 標準品工作液，使用上述色譜條件，結果如下圖所示。

1.3.2 線性與檢出限

配製濃度分別為 1µg/mL、2µg/mL、5µg/mL、25µg/mL、100µg/mL 的標準工作液，按濃度由低至高進樣，以標準品濃度為橫坐標，峰麵積為縱坐標，斑蝥黃線性相關性結果如下。

噪聲按 0.04mV 計算，峰高為 3 倍信噪比對應的濃度為方法檢出限，結果如下表所示。

第 2 章 動物源性食品中斑蝥黃的測定

此方法參考《SN/T 2327-2009 進出口動物源性食品中角黃素、蝦青素的檢測方法》，本標準適用於黃魚、鰻魚、雞肉、雞蛋、鴨肝、豬腎和牛奶中角黃素、蝦青素的測定。

2.1 儀器設備與試劑

實驗過程中其它玻璃器皿還包括容量瓶 (100mL、50mL、25mL、10mL)、移液槍 (0~1000µL，0~5000µL)、移液槍槍頭 (1mL，5mL)、一次性 PVC 手套、一次性口罩、進樣針、濾膜等若幹。

2.2 實驗方法

2.2.1 標準混合工作液配製

標準品的工作液：取一定體積標準儲備液，用流動相稀釋並定容至所需濃度。

2.2.2 試劑配製

乙腈提取液：0.25g BHT 溶解於 500mL 乙腈。

2.2.3 樣品前處理

將生雞蛋煮熟，用高速組織搗碎機充分搗碎、混勻。稱取試樣約 10g (精確至 0.01g) 於 50mL 離心管中，加入 30mL 乙腈提取劑及 10g 無水硫酸鈉，渦旋混合 1min，在 35℃以下水浴超聲提取 10min，再以 3000r/min 離心 5min。將上清液移入預置有 20mL 正己烷的 125mL 分液漏鬥中，震搖 0.5min 後，靜置分層；收集下層乙腈相，正己烷相留在分液漏鬥，待本試樣後續脫脂重複使用。

按上述步驟對離心管中的殘留物每次用 20mL 乙腈提取劑再重複提取兩次，所得提取液用上述正己烷相依次脫脂。合並三次脫脂後所收集的乙腈相，加入 5mL 正丙醇，於 40℃以下旋轉蒸發濃縮近幹，用乙腈溶解並定容至 2.5mL，過濾後濾液待用。

2.2.4 色譜條件

流動相：乙腈 / 水 = 95 / 5 (V / V)

色譜柱：Supersil ODS2 4.6×150mm

流速：1.0mL/min

波長：471nm

進樣量：30µL

溫度：35℃

2.3 實驗結果

2.3.1 典型分離色譜圖

進樣分析濃度為 40µg/mL 準品工作液，使用上述色譜條件，結果如下圖所示。

（圖 2-1 標準品工作液譜圖，橫坐標為 Retention time (min)，範圍 0-35，縱坐標為 Signal (mV)，範圍 0-25，圖中斑蝥黃對應峰的保留時間約為 19.45min）

2.3.2 線性與檢出限

配製濃度分別為 4µg/mL、8µg/mL、40µg/mL、80µg/mL 的標準工作液，按濃度由低至高進樣，以標準品濃度為橫坐標，峰麵積為縱坐標，繪製校準曲線，線性相關性結果如下。

噪聲按 0.03V 計算，峰高為 3 倍信噪比對應的濃度為方法檢出限，結果如下表所示。

2.3.3 實際樣品分離色譜圖

通過上述色譜數據及線性方程計算，某品牌雞蛋中斑蝥黃含量為 2.4 mg/kg。

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