液相色譜柱是液相色譜分析係統的核心部件，實驗結果準不準，很多時候就看它用得對、護得好與否。做好正確使用和日常維護，才能讓每一次分析數據都靠譜。

一、色譜柱使用說明

使用前注意

新色譜柱裏的儲存液，一般是出廠評價報告上指定的流動相。用之前先確認一下這儲存液和你要用到的樣品流動相能不能混溶，別直接混用出問題。要是反相色譜裏，你用的洗脫劑是高濃度鹽或者緩衝液，記得先換成10%低濃度有機相洗脫劑過渡下，這樣能避免鹽析堵了柱子。

流動相要求

配製流動相建議用色譜純的有機溶劑和超純水，要是流動相裏含鹽，應該過一下0.45 μm的濾膜。流動相的容器和在線過濾器也得定期清洗，別讓顆粒雜質堆積。常規的矽膠基質鍵合相填料，適合在pH 2.0-8.0的環境中使用；要是分析堿性化合物，選BDS C18填料更合適，它能耐受pH 2.0-10.0的範圍。不過，要是在pH臨界值附近用了柱子，用完盡快用合適的溶劑清洗幹淨。

樣品處理

樣品得提前預處理，比如用樣品過濾器或者預處理柱（SPE）處理。遇到難處理的樣品，加個保護柱能減少很多麻煩。另外，做正相色譜分析時，所有溶劑和樣品都得嚴格脫水，不然會影響分析結果。

表 1：色譜柱使用關鍵要點

二、色譜柱保存方法

日常保養

每次用了緩衝液或者含鹽的流動相後，先拿 10% 甲醇 / 水衝洗柱子 30 分鍾，把鹽分衝掉，之後再用純甲醇衝洗 30 分鍾。這裏要注意，別用純水直接衝，容易引起填料塌陷，反而損壞柱子。

長期保存

不同類型的柱子，保存方式不一樣：反相柱要泡在純甲醇或者乙腈裏；正相柱得放在脫水的純正己烷中；離子交換柱則保存於含疊氮化鈉的水溶液裏。保存時記得把柱子原裝的堵頭堵好，放在室溫環境下就行。

表 2：色譜柱保存規範

三、色譜柱再生處理

反相柱再生

按順序用20-30倍柱體積的溶劑衝洗：先用甲醇/水（10/90，V/V）溶液衝洗，再用乙腈衝，然後用異丙醇衝；完成後，反順序按異丙醇、乙腈、甲醇/水溶液的再衝一遍。

正相柱再生

同樣用20-30倍柱體積的溶劑依次衝洗：先正己烷，再異丙醇、二氯甲烷，後甲醇；隨後反過來按甲醇、二氯甲烷、異丙醇、正己烷的順序再衝。特別提醒，所有用到的溶劑都必須嚴格脫水，一點水分都不能有。

表 3：色譜柱再生流程

四、常見問題與解決方案

柱壓異常升高

遇到柱壓莫名升高，大概率是這幾個原因，對應處理就行：

篩板堵塞：要麽反衝色譜柱，要麽把柱頭拆下來超聲清洗 —— 用 10% 稀硝酸超聲 10 分鍾，之後再用純水超聲 10 分鍾。

填料汙染：把柱頭前端被汙染的填料換掉就行。

鹽結晶：先用 10% 甲醇 / 水衝洗，把結晶溶解掉，之後再換高濃度甲醇繼續衝。

pH 不合適：要是因為pH不合適導致固定相結構受損，這種情況通常很難恢複，隻能平時多注意色譜柱的pH適用範圍。

表 4：柱壓異常升高問題處理

其實隻要用對方法、做好維護，不僅能延長色譜柱的使用壽命，更能讓每一次分析結果都穩定準確，少走不少實驗彎路。