高效丝瓜黄色视频原理及操作步驟和注意事項【圖文】

高效丝瓜黄色视频是是一種基於經典液相色譜法，結合氣相色譜理論和實驗技術的新型液相色譜分析法，廣泛應用於藥物分析、環境檢測、食品安全及生化研究等領域。其核心原理是通過高壓驅動流動相攜帶樣品通過固定相色譜柱，利用各組分在兩相間分配係數的差異實現分離，並由檢測器定量分析。丝瓜视频黄色视频為您整理HPLC的工作原理、標準化操作步驟及使用注意事項，確保實驗的準確性與儀器的高效運行。

高效液相色譜原理

高效丝瓜黄色视频(HPLC)是應用高效液相色譜原理，主要用於分析高沸點不易揮發的、受熱不穩定的和分子量大的有機化合物的儀器設備。它由儲液器、泵、進樣器、色譜柱、檢測器、記錄儀等幾部分組成。儲液器中的流動相被高壓泵打入係統，樣品溶液經進樣器進入流動相，被流動相載入色譜柱(固定相) 內，由於樣品溶液中的各組分在兩相中具有不同的分配係數，在兩相中做相對運動時，經過反複多次的吸附- 解吸的分配過程，各組分在移動速度上產生較大的差別，被分離成單個組分依次從柱內流出，通過檢測器時，樣品濃度被轉換成電信號傳送到記錄儀，數據以圖譜形式打印出來。

高效丝瓜黄色视频操作工序：

一：配置好實驗所需的流動相(甲醇:水=8:2)和純甲醇，經過濾超聲後備用。

二：打開泵電源。將泵的壓力上限設置為40MPa。(已設定好，可不用再設定)

1.將泵的過濾頭輕輕放入到新配好的純甲醇中，設置流量為1ml,然後按“啟動/停止”鍵開始走液，經過10-20分鍾後按“啟動/停止”鍵停止走液。

2.將泵的過濾頭輕輕放入到新配好的甲醇水中，然後按“啟動/停止”鍵開始走液。

3.打開檢測器電源，調整好檢測器的波長280(已設定好，可不用再設定)，然後按“調零”鍵調零。

三：打開電腦上的UC-3268色譜工作站，左上方出現握手圖標，說明工作站已連接儀器。然後查看基線等基線走直即可進樣。

四：進樣之前先看基線在不在界麵內，如果不在按“調零”鍵調零，之後再開始進標樣，將液體進樣閥扳到“LOAD”位置，將標樣打入液體進樣閥內，再把液體進樣閥扳到“INJECT”位置,此時工作站已啟動，等峰出完後點“停止”鍵。

五:做校正曲線

1.編輯定量參數點擊“定量參數”圖標，彈出方法編輯窗口：設置好“定量方式：（峰麵積）”、“定量方法（外標法）”、“標準（1個濃度標樣，選‘1點’”）、“次方（1次）”、“標樣濃度單位（%）”、“樣品結果單位（%）”。

2.填寫組份表

點擊“組份表”圖標，彈出方法編輯窗口，填入所分析的樣品組份名稱（辣椒素）、保留時間（5.2分鍾左右）及標準濃度（100）。

3.定義校正曲線

點擊“校正曲線”圖標，彈出方法編輯窗口。定義各點對應的色譜峰文件。即先用鼠標指向標樣點號，然後單擊左鍵，則該點號被藍框覆蓋，再單擊右鍵，彈出右鍵可選菜單：

選擇“增加”項（此項操作即表示同一個濃度點，可以加入幾個平行實驗的數據進來進行平均計算），彈出“譜圖選擇”窗口。然後在此選擇相應的譜圖文件，則該序號點的文件前出現一個“+”號。各個點定義完成後，單擊“重校正”即可顯示出校正曲線。點“確認”鍵。

六:進樣品，出完峰後點停止，點屏幕報告即可查看結果。如有多個樣品，可重複 進樣品 此步驟即可。

七:查看以前樣品結果

進入“再處理”界麵，點擊“打開數據文件”圖標，彈出“譜圖選擇”窗口在此選擇樣品譜圖文件，如下：

然後要單擊“重新計算”按鈕，再點擊“屏幕報告”圖標，即可看到屏幕報告表：

八:關機

關閉檢測器電源，按“啟動/停止”鍵停止泵運行，將泵的過濾頭輕輕放入到新配好的純甲醇中，按“啟動/停止”鍵開始走液，經過10-20分鍾，泵壓力穩定後，按“啟動/停止”鍵停止走液，關閉泵電源。電腦不用可提前關閉。

丝瓜黄色视频結構:

1、溶劑輸送係統；儲液器，用來貯存數量足夠、符合要求的流動相。配有溶劑過濾器，以防止流動相中的顆粒進入泵內。脫氣器，脫氣的目的是為了防止流動相從色譜柱內流出時釋放出氣泡進入檢測器，從而引起噪聲，不能正常檢測。

輸液泵，將儲液器中的流動相連續不斷地以高壓形式進入液路係統，使樣品在色譜柱中完成分離過程。梯度洗脫裝置，是在分離過程中通過逐漸改變流動相的組成增加洗脫能力的一種裝置。

2、進樣係統；進樣器：是將樣品送入色譜柱的裝置，進樣方式可以分為兩種：閥進樣或自動進樣。比較常用的是采用自動進樣器裝樣。

3、分離係統；色譜柱：對樣品進行分離，是整個色譜係統的心髒，它的質量優劣直接影響到分離的效果。

4、檢測係統；檢測器：將色譜柱連續流出的樣品組分轉變成易於測量的電信號，被數據係統接收，得到樣品分離的色譜圖。

5、數據處理和記錄係統；對色譜數據進行處理，並參與HPLC儀器的自動控製。

丝瓜黄色视频注意事項：

1、泵正常工作時，在流動相和流速不變的前提下柱壓應該是穩定的，當然在換流動相時壓力變化是正常的，正常情況下如果柱壓升高基本上都是由色譜柱使用時間長引起的（隻有更換色譜柱），如果正常情況下壓力突然降低有可能是（1）接頭處有漏液的地方，采取的方法是有濾紙檢查，如有漏液的地方用扳手擰緊即可。如果沒有漏液則可能是（2）白色的管子裏麵有氣泡從而導致流動相進不到泵裏麵去，采取的方法是排氣泡。排氣時:先STOP停泵--打開排氣閥--按PURGE（快衝）鍵--等氣泡排完後先STOP停泵--擰緊排氣閥，其先後步驟不要搞反了。

2、泵正常工作時最高壓力最好不要超過200KG，所以打開泵以後可以將泵的zui大壓力調到200KG，這樣如果壓力超過上限則會自動報警停機，流速zui好不用超過1ML/MIN，如果使用時壓力超過200KG，建議將流速調低點以降低壓力（在色譜柱正常的情況下），如果是因為色譜柱長時間使用造成壓力升高則建議更換色譜柱（因為色譜柱屬於耗材長時間使用就需要更換，更換的主要依據色譜柱出峰不正常或者柱壓力過高）。

3、泵正常工作時平均每15天左右向注油孔加潤滑油2-3滴。

4、流動相裏麵如果有鹽或酸類，做完實驗後要先用95%二次蒸餾水與5%甲醇洗色譜柱40分鍾左右，然後用純甲醇洗30分鍾左右才可以關機。第二天如果繼續做實驗流動相裏麵仍舊有鹽或酸類，zui好先用95%二次蒸餾水與5%甲醇過渡20分鍾，再用流動相。如果流動相裏麵隻有甲醇，水，乙腈，做完實驗後就不用95%二次蒸餾水5%甲醇衝洗，可直接用純甲醇洗30分鍾即可關機。

5、色譜柱的耐酸PH值範圍3-8使用時不要超出。

6、儀器長期不用時一定要將濾頭泡在甲醇裏半月開機一次，如果開機時泵抽不上液可以打開排氣閥按PURGE快衝。

7、調反壓器時要注意等液體流出來以後才能調，一般調8--10KG，比如現在泵顯示屏顯示柱壓50KG那再增加10KG顯示屏上顯示柱壓60KG然後擰緊鎖緊螺母。

8、關機順序：清洗液路時可以把檢測器直接關機，清洗結束後先按STOP讓泵停止後再關電源，不允許直接關機

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